Высокая частота маркера устойчивости к хлорохину Plasmodium falciparum (мутация pfcrt T76) в Йемене: срочно необходимо пересмотреть политику борьбы с малярией

  1. Абдулсалам М Аль-Мехлафи
  2. Мохаммед А. К. Махди
  3. Хешам М Аль-Мехлафи
  4. Ахмед Азазы
  5. Мун Йик Фонг
  6. Аннотация
  7. методы
  8. Результаты
  9. Выводы
  10. Фон
  11. материалы и методы
  12. Сбор информации
  13. Микроскопическое исследование
  14. Молекулярная идентификация видов Plasmodium и мутация pfcrt T76
  15. Анализ данных
  16. Этическое одобрение
  17. Результаты
  18. Таблица 1
  19. Распространенность и распространение
  20. Одномерный и многомерный анализ
  21. Таблица 2
  22. обсуждение
  23. Выводы
  24. Конкурирующие интересы
  25. Вклад авторов
  26. Подтверждения
  27. Рекомендации

Паразит Векторы. 2011; 4: 94.

Абдулсалам М Аль-Мехлафи

1 Кафедра паразитологии медицинского факультета Малайского университета, 50603 Куала-Лумпур, Малайзия

Мохаммед А. К. Махди

1 Кафедра паразитологии медицинского факультета Малайского университета, 50603 Куала-Лумпур, Малайзия

2 Кафедра паразитологии, факультет медицины и здравоохранения, Университет Саны, Сана, Йемен

Хешам М Аль-Мехлафи

1 Кафедра паразитологии медицинского факультета Малайского университета, 50603 Куала-Лумпур, Малайзия

2 Кафедра паразитологии, факультет медицины и здравоохранения, Университет Саны, Сана, Йемен

Ахмед Азазы

2 Кафедра паразитологии, факультет медицины и здравоохранения, Университет Саны, Сана, Йемен

Мун Йик Фонг

1 Кафедра паразитологии медицинского факультета Малайского университета, 50603 Куала-Лумпур, Малайзия

1 Кафедра паразитологии медицинского факультета Малайского университета, 50603 Куала-Лумпур, Малайзия

2 Кафедра паразитологии, факультет медицины и здравоохранения, Университет Саны, Сана, Йемен

Получено в 2011 году 18 апреля; Принято в 2011 году 27 мая.

Это статья открытого доступа, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution ( http://creativecommons.org/licenses/by/2.0 ), которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе, при условии, что оригинальная работа должным образом процитирована. Эта статья была цитируется другие статьи в PMC.

Аннотация

Фон

Малярия остается серьезной проблемой здравоохранения в Йемене, поскольку Plasmodium falciparum является преобладающим видом, ответственным за 90% случаев заболевания малярией. Несмотря на серьезные опасения в отношении повышения лекарственной устойчивости, хлорохин все еще используется для профилактики и лечения малярии в Йемене. Это исследование было проведено для определения распространенности устойчивости к холорохину (CQR) P. falciparum, выделенного из Йемена, на основе мутации pfcrt T76.

методы

Было проведено перекрестное исследование среди 511 участников из четырех мухафаз Йемена. Образцы крови были подвергнуты скринингу с использованием микроскопической и видоспецифичной гнездовой ПЦР на основе гена 18S рРНК для обнаружения и идентификации видов Plasmodium . Образцы крови, положительные на P. falciparum, были использованы для выявления мутации pfcrt T76 с помощью гнездовой ПЦР.

Результаты

Распространенность мутации pfcrt T76 составила 81,5% (66 из 81 изолята). Прибрежные районы / предгорья имели более высокую распространенность мутации pfcrt T76 по сравнению с горными районами (90,5% против 71,8%) (р = 0,031). Мутация pfcrt T76 имела значительную связь с паразитемией (p = 0,045). Однофакторный анализ показывает значительную связь мутации pfcrt T76 с людьми в возрасте> 10 лет (OR = 9, 95% CI = 2,3 - 36,2, p = 0,001), низкий доход домохозяйства (OR = 5, 95% CI = 1,3 - 19,5, р = 0,027), без брызг инсектицидов (ИЛИ = 3,7, ДИ 95% = 1,16 - 11,86, р = 0,025) и не спящих под сетками, обработанными инсектицидами (ИНН) (ИЛИ = 4,8, ДИ 95% = 1,38 - 16,78, р = 0.01). Модель логистической регрессии подтвердила возраст> 10 лет и низкий доход домохозяйства в качестве предикторов мутации pfcrt T76 в изолятах Йемена P. falciparum .

Выводы

Высокая распространенность мутации pfcrt T76 в Йемене может служить прогностическим маркером распространенности CQR P. falciparum . Это открытие показывает необходимость теста терапевтической эффективности in vivo для CQ. CQR P. falciparum должен быть включен в национальную стратегию борьбы с малярией.

Фон

Малярия остается основной причиной болезней и смертей в мире, особенно среди детей и беременных женщин [ 1 - 4 ]. Лечение малярии зависит от типа и тяжести заболевания. Хлорохин (CQ) является безопасным, недорогим и используется для лечения неосложненной малярии [ 5 ]. Однако с начала 1960-х годов устойчивость P. falciparum к хлорохину возрастает [ 6 - 10 ]. Мутация T76 транспортера устойчивости к CQ P. falciparum ( pfcrt ) является наиболее важным молекулярным маркером [ 11 - 18 ]. Эта точка мутации показала сильную корреляцию с устойчивостью к CQ in vivo и in vitro, что делает мутацию pfcrt T76 значимым маркером для предсказания распространения устойчивости к CQ P. falciparum [ 7 , 16 , 17 , 19 - 23 ]

В Йемене, где 60% всего населения живет в малярийных районах, эта болезнь остается серьезной проблемой для здоровья, но хлорохин все еще используется [ 10 , 24 ]. Три вида Plasmodium ( P. falciparum, P. vivax и P. malariae ) зарегистрированы в Йемене, где преобладает P. falciparum [ 24 - 29 ]. Проблема CQR постоянно растет с момента выявления первых случаев коренного заболевания P. falciparum в 1989 г. 24 ]. За последние два десятилетия было проведено мало исследований для изучения эффективности противомалярийных препаратов в Йемене, как in vivo, так и in vitro [ 24 , 25 , 30 ]. Однако в горных районах, эндемичных по малярии в Йемене, нет информации об устойчивости к противомалярийным лекарственным средствам. Данное исследование является первым исследованием, целью которого является определение распространенности мутации pfcrt 76T среди пациентов с P. falciparum в Йемене и сравнение распространенности мутации pfcrt 76T между высокогорными и прибрежными районами / предгорьями.

материалы и методы

Области исследования и население

Настоящее исследование было проведено в четырех мухафазах Йемена (рисунок). Таиз и Ходейда представляют горные районы и прибрежные районы, соответственно. Рыма и Дамар представляют высокогорные районы. Пиковое время передачи малярии в прибрежных районах приходится на зиму (октябрь-апрель), тогда как в западных горах пик приходится на лето (май-сентябрь). В высокогорных районах (> 2000 метров над уровнем моря) передача малярии происходит в течение всего года [ 31 ] . Anopheles arabiensis является основным переносчиком инфекции в стране, но A. culicifacies играет важную роль в передаче малярии в прибрежных районах. A. sergenti также был обнаружен в горных внутренних и высокогорных районах [ 31 ]. В западном прибрежном районе температура очень высокая и иногда превышает 54 ° C с нерегулярными проливными дождями. Горные районы получают от 1000 до 1500 миллиметров дождя каждый год с мягкой температурой летом и холодной зимой со средней температурой 21 ° C. Климат в высокогорье характеризуется умеренным дождливым летом со средней температурой 20 ° C. Минимальный размер выборки, требуемый для этого исследования (246 субъектов), был рассчитан на основе предыдущей распространенности, о которой сообщалось в Йемене, с уровнем значимости 5% и уровнем достоверности 95% [ 24 , 27 , 32 ].

Минимальный размер выборки, требуемый для этого исследования (246 субъектов), был рассчитан на основе предыдущей распространенности, о которой сообщалось в Йемене, с уровнем значимости 5% и уровнем достоверности 95% [   24   ,   27   ,   32   ]

Географическая карта показывает область исследования .

Сбор информации

В период с июня 2008 года по март 2009 года было собрано 511 образцов крови. Образцы крови были взяты уколами от лихорадящих пациентов из государственных и частных медицинских центров и больниц. Были приготовлены тонкие и толстые пленки крови, и капли крови были нанесены на фильтровальную бумагу Whatman 3 MM (Whatman International Ltd., Мейдстон, Англия). Демографическая и социально-экономическая информация участников была собрана с использованием предварительно протестированной анкеты.

Микроскопическое исследование

Были приготовлены толстые и тонкие пленки крови, высушены на воздухе и окрашены разбавленным красителем Гимзы (1:20, об. / Об.) В течение 20 мин. Все слайды были исследованы местными микроскопистами на наличие малярийных паразитов. Повторное обследование и идентификация на уровне вида проводились слепым способом в двух разных лабораториях двумя экспертами-микроскопистами в соответствии со стандартными и контролируемыми процедурами. Уровни паразитемии были получены из густых мазков путем подсчета количества бесполых паразитов против 200 лейкоцитов и выражены в микролитре крови с использованием предполагаемого количества лейкоцитов в 8000 мас.ч. / мкл.

Молекулярная идентификация видов Plasmodium и мутация pfcrt T76

Геномная ДНК паразита была извлечена из крови, собранной на фильтровальной бумаге. ДНК выделяли с использованием QIAgen DNA Mini Kit для крови и тканей (QIAGEN, Германия) в соответствии с инструкциями производителя. Вложенные ПЦР-анализы на основе гена 18S рРНК были использованы для обнаружения и идентификации видов Plasmodium, как упоминалось ранее [ 33 ]. Обнаружение мутации pfcrt T76 было сделано в соответствии с протоколом, описанным ранее [ 7 , 34 ]. Была использована аллель-специфическая полимеразная цепная реакция (AS-PCR). Гнездо 1 проводили с использованием 250 нМ праймеров TCRP1 (5'-CCG TTA ATA ATA AAT ACA CGC AG-3 ') и TCRP2 (5'-CGG ATG TTA CAA AAC TAT AGT TAC C-3') в 25 мкл. реакционная смесь, содержащая 1X ПЦР-буфер (iNtRON), 2,5 мМ MgCl2 (iNtRON), 0,2 мМ dNTPs (iNtRON), 1 U Taq-полимеразы (iNtRON) и 4 мкл экстрагированной ДНК. Начальную денатурацию проводили в течение 3 минут при 94 ° С, затем 30 циклов денатурации в течение 30 секунд при 94 ° С, отжиг в течение 30 секунд при 56 ° С и удлинение при 60 ° С в течение 1 минуты. Окончательное удлинение проводили при 60 ° С в течение 3 минут.

Для аллель-специфической ПЦР 2 мкл продукта nest 1 использовали в объеме 25 мкл реакции, содержащей 1X буфер ПЦР (iNtRON), 1,5 мМ MgCl2 (iNtRON), 0,2 мМ dNTPs (iNtRON) и 1 U Taq-полимеразы (интрон). Праймер TCRP3 (5'-TGA CGA GCG TTA TAG AG-3 ') использовали с мутант-специфичным праймером TCRP4 m (5'-GTT CTT TTA GCA AAA ATT G-3') или праймером, специфичным для дикого типа. TCRPw (5'-GTT CTT TTA GCA AAA ATT T-3 '). Условия ПЦР выполняли так же, как для гнезда 1, за исключением того, что отжиг составлял 47 ° С, удлинение составляло 64 ° С и число циклов составляло 25. Продукты ПЦР разделяли электрофорезом в 1,5% -ном агарозном геле.

Анализ данных

Анализ данных проводился с помощью SPSS версии 11.5 (SPSS Inc., Чикаго, Иллинойс, США). Критерий хи-квадрат (или точный критерий Фишера при необходимости) использовался для проверки различий между группами. Для однофакторного анализа использовались отношение шансов и 95% доверительный интервал. Значение P <0,05 считалось статистически значимым. Те переменные, которые показали значимость при P <0,05, были использованы для разработки пошаговой модели логистической регрессии.

Этическое одобрение

Протокол этого исследования был одобрен Университетом Сана, Йеменская Республика, и участники с лихорадочным заболеванием, которые дали письменное информированное согласие, были включены в это исследование.

Результаты

Демографическая характеристика

Всего в этом исследовании добровольно приняли участие 511 участников (268 мужчин и 242 женщины) со средним возрастом 20 лет и межквартильным диапазоном 22 лет. Основные характеристики участников приведены в табл.

Таблица 1

Характеристика изучаемой популяции

Переменная n% Возраст (лет) ≤ 10 147 29> 10 364 71 Пол Мужской 268 47 Женский 241 53 Место жительства Сельское 275 54 Городской 234 46 Доход домохозяйства Высокий (≥ 100 долларов США / месяц) 187 37 Низкий (<100 долларов США / месяц ) 322 63 Качество жилья * Хорошее 456 90 Плохое 52 10 Одежда Длинная (покрывающая руки и ноги) 298 59 Короткая 208 41 Распылитель инсектицидов Да 152 30 Нет 353 70 Использование ИНН Да 152 30 Нет 356 70 Поток воды (≤ 200 м домохозяйства ) Да 167 33 Нет 340 67 Закрытие окон дома Да 327 64 Нет 181 36

Из 511 образцов крови малярийные паразиты были обнаружены у 78 (15,3%) при микроскопическом исследовании тонких и толстых пленок крови по сравнению с 86 (16,8%) с помощью вложенной ПЦР-амплификации гена 18S рРНК. Большинство малярийных инфекций были вызваны P. falciparum (80,3%).

Распространенность и распространение

Из 81 положительных образцов P. falciparum мутация pfcrt 76T была обнаружена у 66 (81,5%). Дикий тип был обнаружен в 15 (18,5%) и 10 (10,3%) были смешанными (рисунок). Мутация pfcrt 76T была обнаружена во всех провинциях, где проводилось исследование. Распространенность была значительно выше в прибрежных районах / предгорьях (90,5%) по сравнению с горными районами (71,8%) (χ2 = 4,67, P = 0,031). Была обнаружена значительная связь между мутацией pfcrt 76T и паразитемией (точный критерий Фишера, P = 0,045) (рисунок).

Была обнаружена значительная связь между мутацией pfcrt 76T и паразитемией (точный критерий Фишера, P = 0,045) (рисунок)

Распространенность мутации pfcrt T76 в йеменских изолятах Plasmodium falciparum .

Распространенность мутации pfcrt T76 в йеменских изолятах Plasmodium falciparum

Распространенность мутации pfcrt T76 в изолятах Plasmodium falciparum Yemen в различных эндемичных районах и по данным паразитемии .

Одномерный и многомерный анализ

Связи распространенности мутаций pfcrt 76T с потенциальными факторами риска представлены в табл. Мутация pfcrt 76T была достоверно связана с возрастной группой> 10 лет (OR = 9,2, 95% CI = 2,3-36,2, P = 0,001), низким доходом домохозяйства (OR = 5,0, 95% CI = 1,3-19,5, P = 0,027 ), не распыляя инсектициды (OR = 3,7, ДИ 95% = 1,16-11,86, P = 0,025) и не используя ИНН (OR = 4,8, ДИ 95% = 1,38-16,78, P = 0,01). Используя логистический регрессионный анализ, возрастная группа> 10 лет и низкий доход домохозяйства были сохранены в качестве значимых факторов, связанных с мутациями pfcrt 76T .

Таблица 2

Социально-экономические факторы, связанные с мутацией pfcrt T76

Переменная Pf n Pfcrt T76 n (%) ИЛИ 95% CI P значение # Возраст (годы) ≤ 10 32 20 (63) 9,2 2,3-36,2 0,001 ‡> 10 49 46 (94) Пол Мужской 51 42 (82) 1,16 0,37- 3,71 0,50 Женский 30 24 (80) Проживание в сельской местности 66 54 (82) 1,12 0,07-4,6 0,56 Городской 15 12 (80) Доход домохозяйства Высокий (≥ 100 долларов США / месяц) 11 6 (55) 5 1,3-19,5 0,027 ‡ Низкий ( <100 долларов США / месяц) 70 60 (86) Качество жилья * Хорошее 71 57 (80) 2,21 0,25-18,92 0,408 Плохое 10 9 (90) Одежда Длинная (охватывающая руки и ноги) 27 24 (89) 0,26 0,06-1,3 0,068 Short 54 42 (78) Инсектицидный спрей Да 28 19 (68) 3,7 1,16-11,86 0,025 Нет 53 47 (89) Использование ИНН Да 35 24 (69) 4,8 1,38-16,78 0,01 Нет 46 42 (91) Поток воды (≤ 200 м дом.) Да 49 39 (80) 0,72 0,22-2,35 0,407 Нет 32 27 (84) Закрытие окон дома Да 35 28 (80) 1,18 0,38-3,66 0,492 Нет 46 38 (83)

обсуждение

Малярия является эндемическим заболеванием в Йемене, от которого ежегодно умирают тысячи человек, и почти две трети людей подвержены риску заражения этим заболеванием. Йемен не добился значительного сокращения ежегодного числа случаев заболевания малярией по сравнению с другими странами региона, такими как Ирак, Иран и Саудовская Аравия, которые вступили в стадию ликвидации малярии или предэлиминации [ 10 ]. P. falciparum является преобладающим видом в Йемене, на его долю приходится около 90% случаев малярии [ 24 , 25 , 27 , 28 , 31 , 35 ]. Это исследование зависит от обнаружения одной точечной мутации в кодоне 76T гена pfcrt , которая показала сильную и значительную связь с восприимчивостью in vitro и in vivo к хлорохину [ 11 - 18 ].

Исследование показало высокую распространенность мутации pfcrt 76T в Йемене, причем в прибрежных районах / предгорьях этот показатель выше, чем в высокогорных районах. Этот результат согласуется с предыдущими исследованиями in vivo и in vitro, проведенными в прибрежных районах / предгорьях [ 24 , 30 ]. В Ходейде (прибрежные районы) исследование in vivo выявило CQR у 71% пациентов, инфицированных P. falciparum [ 25 ]. В исследовании in vitro , проведенном в той же области с использованием метода маркера III, сообщалось о 47% CQR [ 30 ]. CQR также сообщалось из Таиза (предгорные районы) с использованием 7-дневного теста in vivo [ 24 ]. Однако ранее не было сообщений о CQR в высокогорных районах, эндемичных по малярии в Йемене. Мутация pfcrt 76T рассматривалась как ключевой детерминант неудачи лечения хлорохином как in vitro, так и в полевых условиях [ 11 - 18 ]. Таким образом, высокая распространенность этого маркера гарантирует осведомленность общественного здравоохранения о появлении и распространении CQR P. falciparum в Йемене.

В настоящем исследовании обнаружена значимая связь мутации pfcrt 76T с умеренной / низкой паразитемией. Связь между мутацией pfcrt 76T и тяжестью малярии является спорным вопросом. Исследования, проведенные в Судане [ 36 ] и Конго [ 37 ] не выявили значительной связи между тяжелой малярией и частотой мутации pfcrt 76T . Тем не менее, значительная связь мутации pfcrt 76T с серьезностью малярии была зарегистрирована в Индии [ 38 ] и Мали [ 21 ]. Причина этих наблюдений до сих пор неясна [ 21 ].

Логистический регрессионный анализ социально-экономических факторов показал значительную связь мутации pfcrt 76T с возрастной группой> 10 лет и низким доходом домохозяйства. Эти результаты могут быть объяснены тем фактом, что эти факторы могут увеличить воздействие укусов комаров на человека, что приводит к высокой интенсивности передачи малярии. Взрослые, особенно в прибрежных районах / предгорье в жаркое время года, носят короткую одежду и могут спать во дворе дома. Низкий доход домохозяйства играет значительную роль в передаче малярии, поскольку он влияет на жилье, жилище, профилактику и лечение [ 39 - 41 ]. Сообщалось о корреляции между интенсивностью передачи малярии и генетическим разнообразием, которое может служить механизмом возникновения лекарственной устойчивости у популяции P. falciparum [ 42 ].

Выводы

Наше исследование выявило высокую распространенность точечной мутации pfcrt 76T в Йемене, что свидетельствует о высокой распространенности и распространенности CQR P. falciparum . Это следует учитывать в национальной стратегии борьбы с малярией. Данные этого исследования подтверждают настоятельную необходимость пересмотра политики борьбы с малярией. Непрерывное наблюдение для выявления появления противомалярийной лекарственной устойчивости имеет важное значение в Йемене.

Конкурирующие интересы

Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих интересов.

Вклад авторов

AMA, MAKM, FMY и AAA разработали исследование; АМА полевые исследования, провели лабораторные работы и сопоставили данные; AMA, MAKM и HMA провели статистический анализ; AMA, MAKM, FMY и AAA интерпретировали данные; AMA и MAKM составили рукопись; FMY, AAA и HMA внесли свой вклад в пересмотр рукописи. Все авторы прочитали и одобрили окончательный вариант рукописи.

Подтверждения

Авторы выражают благодарность Entesar Mansour MH и Nemah OM Bin Shuaib за помощь в работе лаборатории. Выражаем благодарность всему техническому персоналу больниц и медицинских центров в пяти мухафазах, особенно Али Аль-Хавери, Моат М. Мансур, Султан Айеш, Ашраф Салех и Ахлам Аль-Кобати. Мы благодарим Романо Нгау из Департамента паразитологии Малайского университета за создание карты районов исследования. Исследование финансировалось за счет исследовательского гранта Малайского университета, Куала-Лумпур, Малайзия (код исследования PS175 / 2008C).

Рекомендации

  • Сакс Дж., Малани П. Экономическое и социальное бремя малярии. Природа. 2002; 415: 680–685. doi: 10.1038 / 415680a. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ]
  • Хвиид Л. Особенности адгезии эритроцитов, инфицированных Plasmodium falciparum, участвующих в патогенезе малярии, связанной с беременностью. Am J Pathol. 2007; 170: 1817–1819. doi: 10.2353 / ajpath.2007.070246. [ PMC бесплатная статья ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ]
  • Joubert F, Harrison CM, Koegelenberg RJ, Odendaal CJ, de Beer TA. Discovery: интерактивный ресурс для рационального отбора и сравнения предполагаемых лекарственных белков-мишеней при малярии. Малар Дж. 2009; 8: 178. doi: 10.1186 / 1475-2875-8-178. [ PMC бесплатная статья ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ]
  • Корбель V, Генри MC. Профилактика малярии и сонной болезни в Африке и борьба с ней: куда мы идем и куда идем? Паразит Векторы. 2011; 4:37. doi: 10.1186 / 1756-3305-4-37. [ PMC бесплатная статья ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ]
  • Кетема Т., Гетахун К., Бача К. Терапевтическая эффективность хлорохина для лечения случаев малярии Plasmodium vivax в округе Халаба, Южная Эфиопия. Паразит Векторы. 2011; 4:46. doi: 10.1186 / 1756-3305-4-46. [ PMC бесплатная статья ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ]
  • Bloland B. Лекарственная устойчивость при малярии. Том 27. Женева: Всемирная организация здравоохранения; 2001. WHO / CDS / DRS / 2001-4 . [ Google ученый ]
  • Джимде А, Думбо О.К., Кортезе Дж.Ф., Кайентао К, Думбо С, Диурте Y, Дико А, Су XZ, Номура Т, Фидок Д.А. et al. Молекулярный маркер устойчивой к хлорохину малярии falciparum. N Engl J Med. 2001; 344: 257–263. doi: 10.1056 / NEJM200101253440403. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ]
  • Trape JF, Pison G, Spiegel A, Enel C, Rogier C. Борьба с малярией в Африке. Тенденции Паразитол. 2002; 18: 224–230. doi: 10.1016 / S1471-4922 (02) 02249-3. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ]
  • Mita T, Tanabe K, Kita K. Распространение и эволюция лекарственной устойчивости Plasmodium falciparum . Паразитол Инт. 2009; 58: 201–209. doi: 10.1016 / j.parint.2009.04.004. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ]
  • КТО. Книга Всемирный доклад о малярии. Город: Всемирная организация здравоохранения; 2009. Доклад о малярии в мире. [ Google ученый ]
  • Ursing J, Kofoed PE, Родригес A, Rombo L, Gil JP. Генотипы Plasmodium falciparum, связанные с устойчивостью к хлорохину и амодиахину в Гвинее-Бисау. Am J Trop Med Hyg. 2007; 76: 844–848. [ PubMed ] [ Google ученый ]
  • Джимде А.А., Доло А, Уаттара А, Диаките С, Плоу CV, Доумбо ОК. Молекулярная диагностика устойчивости к противомалярийным препаратам во время эпидемий и в зонах военных действий. J Infect Dis. 2004; 190: 853–855. doi: 10.1086 / 422758. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ]
  • Djimde A, Doumbo OK, Steketee RW, Plowe CV. Применение молекулярного маркера для эпиднадзора за хлорохинрезистентной малярией falciparum. Ланцет. 2001; 358: 890–891. doi: 10.1016 / S0140-6736 (01) 06040-8. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ]
  • Лакшманан В., Брей П.Г., Вердье-Пинард Д., Джонсон Д.Дж., Хоррокс П., Мухле Р.А., Алакпа Г.Е., Хьюз Р.Х., Уорд С.А., Крогстад ​​Д.Д. et al. Критическая роль PfCRT K76T в устойчивости к обратимому хлорохину Plasmodium falciparum verapamil. EMBO J. 2005; 24: 2294-2305. doi: 10.1038 / sj.emboj.7600681. [ PMC бесплатная статья ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ]
  • Wilson PE, Kazadi W, Kamwendo DD, Mwapasa V, Purfield A, Meshnick SR. Распространенность мутаций pfcrt в изолятах конголезского и малавийского Plasmodium falciparum, определенная с помощью нового анализа Такмана. Acta Trop. 2005; 93: 97–106. doi: 10.1016 / j.actatropica.2004.09.010. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ]
  • Тагельсир Н., Ибрагим З., Медани А., Салих О., Хамад А., Гиха Н., Эль-Агиб А., Хан Б., Саид Н., Ибрагим М. Высокая частота Plasmodium falciparum PfCRT K76T и PfpghN86Y у пациентов, очищающих инфекцию после лечения хлорохином в Судан. Acta Trop. 2006; 97: 19–25. doi: 10.1016 / j.actatropica.2005.07.030. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ]
  • Винаяк С., Бисвас С., Дев В., Кумар А., Ансари М.А., Шарма Ю.Д. Распространенность мутации K76T в гене pfcrt Plasmodium falciparum среди респондеров-хлорохинов в Индии. Acta Trop. 2003; 87: 287–293. doi: 10.1016 / S0001-706X (03) 00021-4. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ]
  • Мита Т., Канеко А., Хомбхандже Ф., Хвайхванье И., Такахаси Н., Осава Х., Цукахара Т., Маста А., Лум Дж. К., Кобаякава Т. и др. Роль мутаций pfmdr1 в резистентности к хлорохину у Plasmodium falciparum изолятов с pfccrpt Гвинея. Acta Trop. 2006; 98: 137–144. doi: 10.1016 / j.actatropica.2006.03.002. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ]
  • Ранджит М.Р., Дас А, Чхотрай Г.П., Рот Р.Н., Кар С.К. Точечная мутация PfCRT (K76T) в Plasmodium falciparum и ее полезность для мониторинга устойчивости к хлорохину. Энн Троп Мед Паразитол. 2004; 98: 879–882. doi: 10.1179 / 000349804X3162. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ]
  • Ватсала П.Г., Праманик А., Дханасекаран С., Деви К.У., Пиллай К.Р., Суббарао С.К., Гош С.К., Тивари С.Н., Сатьянараян Т.С., Дешпанде ПР. et al. Широко распространена встречаемость гена гаплотипа SVMNT транспортера устойчивости к хлорохину Plasmodium falciparum ( Pfcrt ) у малярии P. falciparum в Индии. Am J Trop Med Hyg. 2004; 70: 256–259. [ PubMed ] [ Google ученый ]
  • Веле М, Джимде А.А., Гиндо А., Бивогуи А.Х., Траоре И.З., Саду А., Блейз Д., Диалло Д.А., Веллемс Т.Е., Думбо ОК. Высокая частота PfCRT 76T в двух малийских деревнях и его распространенность в тяжелой форме по сравнению с не тяжелой малярией. Acta Trop. 2011. [ PMC бесплатная статья ] [ PubMed ]
  • Ежедневно JP, Робертс С, Томас СМ, Ндир О, Дьенг Т, Мбуп С, Вирт ДФ. Распространенность полиморфизмов Plasmodium falciparum pfcrt и чувствительность к хлорохину in vitro в Сенегале. Паразитология. 2003; 126: 401–405. doi: 10.1017 / S0031182003002981. [ PMC бесплатная статья ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ]
  • Очонг Э.О., ван ден Брук И.В., Кеус К., Нзила А. Краткий отчет: связь между устойчивостью к хлорохину и амодиахину и аллельной изменчивостью в гене множественной лекарственной устойчивости 1 Plasmodium falciparum и геном переносчика устойчивости к хлорохину в изолятах из верхнего Нила в южном Судане , Am J Trop Med Hyg. 2003; 69: 184–187. [ PubMed ] [ Google ученый ]
  • Алкади Х.О., Аль-Мактари М.Т., Нооман М.А. Местный штамм Plasmodium falciparum, устойчивый к хлорохину, в мухафазе Таиз, Йеменская Республика. Химиотерапия. 2006; 52: 166–170. doi: 10.1159 / 000093592. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ]
  • Аль-Мактари М.Т., Бассиуны Х.К. Статус малярии в мухафазе Аль-Ходейда, Йеменская Республика. Часть II: Человеческие факторы, вызывающие устойчивость к хлорохину резистентного местного штамма P. falciparum . J Egypt Soc Parasitol. 2003; 33: 829–839. [ PubMed ] [ Google ученый ]
  • Бассиуны ХК, Аль-Мактари МТ. Малярия на поздних сроках беременности в мухафазе Аль-Ходейда, Йемен. East Mediterr Health J. 2005; 11: 606–617. [ PubMed ] [ Google ученый ]
  • Аль-Тайар А, Джафар С, Ассабри А, Аль-Хабори М, Азазы А, Аль-Махди Н, Амин К, Гринвуд Б.М., Уитти СиДжей. Сильная малярия у детей в Йемене: обсервационное исследование на двух участках. BMJ. 2006; 333: 827. doi: 10.1136 / bmj.38959.368819.BE. [ PMC бесплатная статья ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ]
  • Аль-Мехлафи А.М., Махди М.А., А.А., Фонг М.Ю. Молекулярная эпидемиология видов Plasmodium, распространенных в Йемене, основана на 18 с рРНК. Паразит Векторы. п. 110. [ PMC бесплатная статья ] [ PubMed ]
  • Аль-Мехлафи А., Махди М., Азазы А., Фонг М. Клиническая ситуация с эндемической малярией в Йемене. Тропическая биомедицина. 2010; 27: 551–558. [ PubMed ] [ Google ученый ]
  • Аль-Шамахи H, Аль-Харази А.Х., Хармал Н.С., Аль-Кабси А.М. Распространенность и степень устойчивости Plasmodium falciparum к противомалярийным препаратам первого ряда: исследование in vitro в эндемичной области малярии в Йемене. Ann Saudi Med. 2007; 27: 432–436. doi: 10,4103 / 0256-4947,51457. [ PMC бесплатная статья ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ]
  • NMCP. Книга Малярия Отчет. Город: Национальная программа борьбы с малярией; 2002. Отчет о малярии. [ Google ученый ]
  • Бин Моханна М.А., Бин Гут А.С., Раджа Я. Признаки малярии и уровень заболеваемости среди бессимптомных школьников в долине Хаджр, Йемен. East Mediterr Health J. 2007; 13: 35–40. [ PubMed ] [ Google ученый ]
  • Аль-Мехлафи А.М., Махды М.А., Азазы А.А., Фонг М.Ю. Молекулярная эпидемиология видов Plasmodium, распространенных в Йемене, основана на 18-й рРНК. Паразит Векторы. 2010; 3: 110. doi: 10.1186 / 1756-3305-3-110. [ PMC бесплатная статья ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ]
  • Тинто H, Уэдраого JB, Эрхарт A, Ван Овермейр C, Dujardin JC, Ван Марк E, Guiguemde TR, D'Alessandro U. Отношения между мутациями Pfcrt T76 и Pfmdr-1 Y86 в Plasmodium falciparum и in vitro / in vivo chloro сопротивление в Буркина-Фасо, Западная Африка. Infect Genet Evol. 2003; 3: 287-292. doi: 10.1016 / j.meegid.2003.08.002. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ]
  • Азазы А.А., Раджа'а Я. Малярия и кишечный паразитоз у детей, поступающих в педиатрический центр в Сане, Йемен. East Mediterr Health J. 2003; 9: 1048-1053. [ PubMed ] [ Google ученый ]
  • Гиха Х.А., Эльбашир М.И., ИЭ АЕ, ТМ АЕ, ЭльГазали Г.Е., Макиннон М.Дж., Бабикер Х.А. Отношения лекарственной устойчивости и вирулентности у Plasmodium falciparum, вызывающего тяжелую малярию в зоне сезонной и нестабильной передачи. Acta Trop. 2006; 97: 181–187. doi: 10.1016 / j.actatropica.2005.10.004. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ]
  • Mayengue PI, Kalmbach Y, Issifou S, Кремснер PG, Ntoumi F. Отсутствие изменений в распространенности точечных мутаций в генах Pfcrt и Pfmdr1 в изолятах от габонских пациентов с неосложненной или тяжелой малярией Plasmodium falciparum . Паразитол Res. 2007; 100: 487–493. [ PubMed ] [ Google ученый ]
  • Ранджит М.Р., Дас А., Чхотрай Г.П., Дас Б.П., Дас Б.Н., Ачарья А.С. Точечная мутация PfCRT (K76T) способствует множественности клонов и тяжести заболевания при инфекции Plasmodium falciparum . Троп Мед Инт Здоровье. 2004; 9: 857-861. doi: 10.1111 / j.1365-3156.2004.01286.x. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ]
  • Чума JM, Thiede M, Molyneux CS. Переосмысление экономических издержек малярии на уровне домохозяйств: свидетельство применения новой аналитической системы в сельской Кении. Малар Дж. 2006; 5:76. doi: 10.1186 / 1475-2875-5-76. [ PMC бесплатная статья ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ]
  • Хасташ С., Нахер М., Джоссу Ф., Карме Б. Факторы риска малярии у детей индейцев во Французской Гвиане. Am J Trop Med Hyg. 2007; 76: 619–625. [ PubMed ] [ Google ученый ]
  • Аль-Тайар А., Ассабри А., Аль-Хабори М., Азазы А., Альгабри А., Алганади М., Уитти С. Дж., Джаффар С. Социально-экономические и экологические факторы, важные для приобретения несерьезной малярии у детей в Йемене: исследование «случай-контроль». Trans R Soc Trop Med Hyg. 2009; 103: 72–78. doi: 10.1016 / j.trstmh.2008.09.010. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ]
  • Кан Дж. М., Мун Су, Ким Дж., Чо Ш. Х., Лин К, Сон В. М., Ким Т. С., На Б. К. Генетический полиморфизм поверхностного белка-1 мерозоита и поверхностного белка-2 мерозоита в полевых изолятах Plasmodium falciparum из Мьянмы. Малар Дж. 2010; 9: 131. doi: 10.1186 / 1475-2875-9-131. [ PMC бесплатная статья ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ]

Профилактика малярии и сонной болезни в Африке и борьба с ней: куда мы идем и куда идем?